Bewerking LacZ gen

lacZ gen bewerking

Tijdens dit practicum gebruiken jullie CRISPR-Cas9 om het bacterieel DNA te knippen op de plaats van het lacZ gen, dit gen codeert voor het enzym β-galactosidase (β-gal). Het lacZ gen is een deel van het lac operon, een collectie van genen die bacteriën in staat stellen om lactose als voedingsbron te gebruiken. Het is tevens mooi meegenomen dat β-gal de kleurloze verbinding X-gal in 2 delen kan splitsen, waarvan er een (donker)blauw is. Als bij bacteriën het lacZ gen tot uiting komt en β-gal wordt geproduceerd, zal dit betekenen dat bij aanwezigheid van X-gal de bacteriën blauw kleuren. Tientallen jaren hebben moleculaire biologen het lacZ gen gebruikt als doelgerichte locatie om zeer nauwkeurig veranderingen in het DNA te kunnen aanbrengen. Aan de hand van deze kleurverandering kon men dan zien of dit was geslaagd.