Nucleotidesequentie bepalen

Bepalen van nucleotide volgorde van DNA

• bepalen door speciale PCR reactie
• toevoegen van didesoxynucleotiden (ddA, ddC, ddG, ddT), hebben geen OH-groep aan 3' uiteinde waardoor de replicatie stopt na het inbouwen van deze nucleotide
  
• didesoxynucleotiden zijn gelabeled met een fluoriscerende stof
• vervolgens ga je met dna-polymerase, ddA, dna-nucleotiden en primers dna synthese uitvoeren
• hierdoor ontstaan verschillende lengtes dna fragmenten met op het einde een ddA
• dit herhaal je met ddC, ddG en ddT
• aan de hand van gel-elektroforese worden DNA fragmenten gescheiden